Productes

La diferenciació de fibroblasts orbitals en adipòcits madurs i la posterior acumulació de teixit adipós s'ha demostrat en la progressió de l'orbitopatia de Graves (GO).L'autofàgia està implicada en l'adipogènesi, però se sap poc sobre el paper de l'autofàgia en l'inici i la progressió de la GO.L'objectiu d'aquest estudi és investigar el paper de l'autofàgia en la patogènesi de GO. Es van analitzar els explantes de teixit adipós/conjuntiu orbital de pacients amb GO i de subjectes normals, així com fibroblasts orbitals aïllats.L'adipogènesi es va induir mitjançant un medi diferenciador amb peròxid d'hidrogen o sense, i l'autofàgia es va manipular mitjançant bafilomicina A1 i ARN de forquilla curta (shRNA) dirigit a Atg5.Els autofagosomes es van identificar mitjançant microscòpia electrònica.L'expressió de gens relacionats amb l'autofàgia i els factors de transcripció relacionats amb l'adipogènesi es van analitzar mitjançant la reacció en cadena de la polimerasa-transcripció inversa en temps real i/o l'anàlisi Western blot.L'acumulació de gotes de lípids es va examinar mitjançant una tinció d'Oil Red O. Els vacúols autofàgics eren més abundants a les cèl·lules GO que a les no GO (p<0, 05).L'expressió de gens relacionats amb l'autofàgia era significativament més alta en teixits i cèl·lules GO que en els seus homòlegs no GO, respectivament.La interleucina-1β va augmentar la proteïna LC3-II, p62 i Atg7 a les cèl·lules GO.L'acumulació d'autofagosoma es va mostrar el dia 4 de l'adipogènesi i va disminuir el dia 10, juntament amb la formació de gotes de lípids.L'expressió de les proteïnes LC3 i p62 va augmentar en les 48 hores posteriors a la diferenciació i va disminuir gradualment del dia 4 al 10. El tractament amb bafilomicina A1 i la derrota d'Atg5 per part de l'shRNA van inhibir l'acumulació de gotes de lípids i van suprimir l'expressió de marcadors adipogènics. teixit i cèl·lules no GO, cosa que suggereix que l'autofàgia té un paper en la patogènesi de GO.La manipulació de l'autofàgia pot ser un objectiu terapèutic per a GO.