Productes

LecA (PA-IL) és una lectina i adhesina citotòxiques produïdes per Pseudomonas aeruginosa que s'uneix als galactòsids hidrofòbics amb alta especificitat i afinitat.Mitjançant una fusió de traducció lecA-egfp i una anàlisi d'immunoblot de la matriu extracel·lular del biofilm, mostrem que lecA s'expressa en cèl·lules cultivades amb biofilm.En els assajos de biofilm estàtics tant en poliestirè com en acer inoxidable, la profunditat i la cobertura de la superfície del biofilm es van reduir per la mutació de lecA i es van millorar a la soca PAO-P47 que sobreprodueix LecA.La cobertura de la superfície del biofilm per part de la soca progenitora, PAO-P47, però no el mutant lecA dels cupons d'acer, també es va inhibir pel creixement en presència d'isopropil-beta-D-tiogalactoside (IPTG) o p-nitrofenil-alfa-D-galactoside ( NPG).A més, els biofilms madurs de tipus salvatge formats en absència d'aquests galactòsids hidrofòbics es podrien dispersar mitjançant l'addició d'IPTG.En canvi, l'addició de p-nitrofenil-alfa-L-fucosa (NPF) que té una alta afinitat per la lectina de P. aeruginosa LecB (PA-IIL) no va tenir cap efecte en la formació o dispersió de biofilm.El creixement planctònic de P. aeruginosa PAO1 no es va veure afectat per la presència d'IPTG, NPG o NPF, ni la soca va ser capaç d'utilitzar aquests sucres com a fonts de carboni, cosa que suggereix que els efectes observats sobre la formació de biofilm es van deure a la inhibició competitiva del lligand LecA. enquadernació.També es van obtenir resultats similars per a biofilms cultivats en condicions de flux dinàmic en cupons d'acer, cosa que suggereix que LecA contribueix a l'arquitectura del biofilm de P. aeruginosa en diferents condicions ambientals.

S'ha detectat una alfa-L-fucosidasa (EC 3.2.1.51) capaç d'alliberar el residu de t-fucosil de la cadena lateral dels oligosacàrids de xiloglucà a les fulles de les plantes d'Arabidopsis.A més, es va purificar una alfa-L-fucosidasa amb una especificitat de substrat similar a partir de fulles de col (Brassica oleracea) per fer una banda única a SDS-PAGE.D'aquesta banda de proteïnes es van obtenir dues seqüències de pèptids i es van utilitzar per identificar un gen d'Arabidopsis que codificava una alfa-fucosidasa que proposem anomenar AtFXG1.A més, també s'ha trobat un gen d'Arabidopsis amb homologia amb alfa-L-fucosidases conegudes, i vam proposar anomenar-lo AtFUC1.Tant AtFXG1 com ATFUC1 es van expressar heteròlogament a les cèl·lules de Pichia pastoris i les activitats alfa-L-fucosidasa secretades al medi de cultiu.L'alfa-L-fucosidasa codificada per AtFXG1 era activa contra els oligosacàrids del xiloglucà XXFG, així com contra el 2'-fucosil-lactitol, però no contra el p-nitrofenil-alfa-L-fucopiranòsid.Tanmateix, l'AtFUC1 expressat heteròlogament només era actiu contra el 2'-fucosil-lactitol.Per tant, el primer ha d'estar relacionat amb el metabolisme del xiloglucà.