Notícies

Hi ha molts herois no reconeguts al nostre voltant, que semblen corrents, però de fet ens aporten molt en silenci.La proteinasa K és l'"heroi no reconegut" a la indústria del diagnòstic molecular, tot i que en comparació amb la "gran i poderosa" de la indústria, la proteinasa K és tan discreta que fa temps que hem passat per alt la seva importància.Amb l'esclat de la nova epidèmia de la corona, la demanda de proteïnasa K s'ha disparat i l'oferta a casa i a l'estranger està molt per darrere del consum, i de sobte tothom es va adonar que la proteinasa K és tan important.
Quin és l'ús de la proteinasa K
La proteinasa K és una serina proteasa amb activitat enzimàtica proteolítica i pot mantenir l'activitat en un ampli ventall d'ambients (pH (4-12,5), tampó d'alta sal, alta temperatura de 70 °C, etc.).A més, l'activitat de la proteinasa K no està inhibida per SDS, urea, EDTA, clorhidrat de guanidina, isotiocianat de guanidina, etc., i una certa quantitat de detergent també pot millorar l'activitat de la proteinasa K. En tractaments mèdics (desinfecció per virus i microbis). ), alimentació (tendresa de carn), cuir (suavització del cabell), vinificació (clarificació d'alcohol), preparació d'aminoàcids (plomes degradades), extracció d'àcids nucleics, hibridació in situ, etc., proteinasa K Hi ha aplicacions.L'aplicació més utilitzada és l'extracció d'àcids nucleics.
La proteinasa K pot enzimolitzar tot tipus de proteïnes de la mostra, incloses les histones que estan estretament unides als àcids nucleics, de manera que els àcids nucleics es poden alliberar de la mostra i alliberar-se a l'extracte, facilitant el següent pas d'extracció i purificació.En la detecció d'àcid nucleic viral, la proteinasa K és un dels components importants de la solució de mostreig del virus.La proteinasa K pot trencar i inactivar la proteïna de la capa del virus, que és més segura durant l'etapa de transport i detecció;a més, la proteinasa K també pot degradar la RNasa evita la degradació de l'ARN viral i facilita la detecció d'àcids nucleics.
La fama nocturna de la proteinasa K
Ja sigui en el camp de la investigació científica o en el camp de l'IVD, l'extracció d'àcids nucleics és l'experiment més bàsic, per la qual cosa la proteinasa K sempre ha estat una existència molt important.Tanmateix, en el passat, la proteinasa K era molt menys coneguda que el seu paper.Una gran part d'això va ser perquè la relació d'oferta i demanda de la proteinasa K era molt estable.Poca gent pensaria que el subministrament de proteinasa K seria un problema.
Amb l'esclat de la nova epidèmia de la corona, la demanda de proves d'àcid nucleic ha augmentat.A finals de juny de 2020, la Xina ha completat prop de 90 milions de proves de corones noves, i aquesta xifra és encara més alarmant a escala mundial.En els experiments d'extracció d'àcids nucleics, la concentració de treball de la proteinasa K és d'uns 50-200 μg/mL.En general, es necessiten uns 100 μg de proteinasa K per extreure una mostra d'àcid nucleic.En l'ús real, per augmentar l'eficiència de l'extracció d'àcids nucleics, sovint s'utilitzarà la Proteinasa K en una quantitat més gran.La detecció d'àcids nucleics del nou coronavirus ha comportat una gran quantitat de demanda de proteinasa K.L'equilibri original de l'oferta i la demanda de la proteinasa K es va trencar ràpidament i la proteinasa K es va convertir en un important material de prevenció d'epidèmies durant la nit.
Dificultats en la producció de proteinasa K
Tot i que amb el desenvolupament de l'epidèmia, la gent ha valorat l'important valor de la proteinasa K, és vergonyós que, a causa de l'excés de clau baixa de la proteinasa K, poques empreses nacionals s'han implicat en la producció de proteinasa K. Quan les persones volen establir la producció de proteinasa K Durant el procés de producció, es va descobrir que la proteinasa K és una proteïna extremadament especial.És extremadament difícil ampliar la capacitat de producció de proteïnasa K en un curt període de temps.
La producció a gran escala de proteinasa K s'enfronta a les següents dificultats
1. Baixa expressió
La proteinasa K pot degradar inespecíficament la majoria de proteïnes i causar una toxicitat greu a la cèl·lula hoste d'expressió.Per tant, el nivell d'expressió de la proteinasa K és generalment molt baix.El cribratge de sistemes d'expressió i soques que expressen altament la proteinasa K generalment requereix un cicle més llarg.
2. Residus de pigments i àcids nucleics
La fermentació a gran escala introdueix una gran quantitat de pigments i residus d'àcid nucleic hoste.És difícil eliminar aquestes impureses amb un procés de purificació senzill, i la purificació complexa augmenta el cost i redueix la taxa de recuperació.
3. Inestabilitat
La proteinasa K no és prou estable, es pot enzimolitzar per si mateixa i és difícil emmagatzemar-la de manera estable a 37 ° C durant molt de temps sense un agent protector.
4. Fàcil de precipitar
Quan es prepara la pols liofilitzada de proteinasa K, per tal d'assegurar que el contingut sòlid de proteïnasa K a la pols liofilitzada sigui gran, cal afegir un agent protector liofilitzat a alta concentració, però quan el la concentració de proteinasa K arriba als 20 mg/mL i més, és fàcil L'agregació forma un precipitat, la qual cosa comporta grans dificultats per a la liofilització de la proteinasa K amb un alt contingut en sòlids.
5. Gran inversió
La proteinasa K té una forta activitat proteasa i pot hidrolitzar altres proteases al laboratori.Per tant, la proteinasa K requereix àrees de producció especialitzades, equips i personal per a la investigació, el desenvolupament i la producció.
Solució de proteinasa K de XD BIOCHEM
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
Les solucions tècniques de XD BIOCHEM inclouen
Mitjançant la integració de plasmidis de múltiples còpies, es seleccionen soques d'alta expressió amb un nivell d'expressió de 8 g/L, la qual cosa supera el problema del baix nivell d'expressió de la proteinasa K;
Mitjançant l'establiment d'un procés de purificació de diversos passos, el citocrom hoste i els residus d'àcid nucleic de la proteïnasa K es van eliminar amb èxit per sota del valor estàndard;
Mitjançant el cribratge d'alt rendiment de formulacions de tampó protector, es va seleccionar un tampó que pot emmagatzemar de manera estable la proteïnasa K a 37 ° C;
Els tampons de cribratge supera el problema que la proteïna K és fàcil d'agregar i precipitar a concentracions elevades, i posa les bases per a la liofilització d'alt contingut en sòlids de la proteinasa K.

Mostra de proteinasa K XD BIOCHEM

Prova d'estabilitat de la proteinasa K XD BIOCHEM: no hi haurà canvis significatius en l'activitat després de 80 dies a temperatura ambient

Prova d'estabilitat de la proteinasa K XD BIOCHEM: no hi haurà canvis significatius en l'activitat després de 80 dies a temperatura ambient

Comparació de l'efecte d'extracció d'àcids nucleics de XD BIOCHEM proteinasa K i productes competidors.En el procés d'extracció d'àcids nucleics, s'utilitzen XD BIOCHEM i la proteinasa competitiva K respectivament.L'eficiència d'extracció de la proteinasa K XD BIOCHEM és més alta i el valor Ct del gen objectiu és menor.