Productes

L'acumulació nuclear d'una forma mutant de la proteïna nuclear Lamin-A, anomenada Progerin (PG) o Lamin AΔ50, es produeix a la síndrome de Hutchinson-Gilford Progeria (HGPS) o Progeria, una malaltia d'envelliment accelerat.Un dels principals símptomes d'aquest trastorn genètic és la pèrdua de greix subcutani a causa d'una dramàtica lipodistròfia. Hem induït de manera estable l'expressió de PG i GFP humans -Green Fluorescent Protein- com a control en cèl·lules 3T3L1 mitjançant un sistema lentiviral per estudiar la efecte de l'expressió de PG en la capacitat de diferenciació d'aquesta línia cel·lular, un dels models adipogènics més utilitzats.Es va fer proteòmica quantitativa (iTRAQ) per estudiar l'efecte de l'acumulació de PG.Diverses de les proteïnes modulades es van validar mitjançant immunoblot i PCR en temps real.La funció mitocondrial es va analitzar mitjançant la mesura de a) l'activitat basal mitocondrial, b) la producció d'anions superòxid i c) l'eficiència individual dels diferents complexos de la cadena respiratòria. Hem trobat que la sobreexpressió de PG mitjançant el lliurament del gen lentiviral condueix a un disminució de la taxa de proliferació i defectes en la capacitat adipogènica en comparació amb el control.L'anàlisi de proteòmica quantitativa va mostrar 181 proteïnes significativament (p<0, 05) modulades en preadipòcits que expressen PG.La funció mitocondrial està deteriorada a les cèl·lules que expressen PG.Concretament, hem detectat un augment de l'activitat del complex I i una sobreproducció d'anió superòxid.La incubació amb agents eliminadors d'espècies reactives d'oxigen (ROS) condueix a una disminució de la proteòlisi autofàgica tal com revela la relació LC3-II/LC3-I. L'expressió de PG a les cèl·lules 3T3L1 promou canvis en diversos processos biològics, inclosa l'estructura del citoesquelet, el metabolisme dels lípids, el calci. regulació, traducció, plegament de proteïnes i generació d'energia per part dels mitocondris.Les nostres dades reforcen la contribució de l'acumulació de ROS al fenotip d'envelliment prematur i estableixen un vincle entre la disfunció mitocondrial i la pèrdua de proteòstasi en HGPS.