Productes

El present estudi descriu un mètode senzill i eficaç que utilitza la cromatografia líquida d'alt rendiment (HPLC) acoblada a la detecció de fluorescència per a la determinació dels paràmetres cinètics de la captació de glutamat al teixit nerviós.El teixit retinià obtingut de pollets de 7 dies es va incubar amb concentracions conegudes de glutamat (50-2000 μM) durant 10 min i es van mesurar els nivells del neurotransmissor derivat de l'o-ftaldehid (OPA) al medi d'incubació.Avaluant la diferència entre les concentracions inicials i finals de glutamat en el medi, es va caracteritzar un mecanisme d'absorció saturable (K(m)=8,2 i V(max)=9,8 nmol/mg proteïna/min).Aquesta mesura depenia en gran mesura del sodi i la temperatura, donant suport fermament que el mecanisme de disminució de la concentració és efectivament absorbit per transportadors d'alta afinitat.A més, els nostres resultats també van demostrar que el clorur de zinc (un inhibidor dels transportadors de glutamat/aspartat) va provocar una disminució depenent de la concentració de la captació de glutama te, demostrant l'especificitat de la nostra metodologia.En general, el present treball caracteritza una metodologia alternativa per avaluar la captació de glutamat al teixit nerviós mitjançant HPLC.Aquest enfocament podria ser una eina important per als estudis associats a la caracterització de minúscules alteracions en el transport de glutamat relacionades amb lesions del sistema nerviós central.