ONPG CAS: 369-07-3 98,0% min de pols de blanc a blanc apagat
| Número de catàleg | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| nom del producte | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galactopiranòsid) |
| Fórmula molecular | C12H15NO8 |
| Pes molecular | 301.25 |
| Detalls d'emmagatzematge | 2 a 8 °C |
| Codi Tarifari Harmonitzat | 29400000 |
Especificació del producte
| Puresa (HPLC) | Min.98,0% |
| Aparença | Pols de color blanc a blanquinós |
| Solució(1% en aigua) | Solució clara, incolora a lleugerament groga |
| Contingut d'aigua(Karl Fisher) | Màx.0,5% |
| Rotació òptica específica [α]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C a -73,0 °C |
Discussió sobre la prova ONPG (prova de β-galactosidasa)
Darrerament s'han plantejat freqüentment preguntes: 1. Per què es pot utilitzar la prova ONPG per distingir la fermentació retardada de la lactosa?2. Per què la norma nacional estableix que és necessari utilitzar ferro trisacàrid de clorur de sodi al 3% (o ferro trisacàrid) per a la prova ONPG?3. Per a Vibrio parahaemolyticus, quan es realitza la prova OPNG, per què s'ha d'afegir toluè gota a gota segons la norma?Quina és la funció?
La nostra empresa ha revisat molta informació, l'ha resumit i l'ha compartit amb vosaltres a continuació:
Principi: el nom xinès de ONPG és o-nitrobenzene-β-D-galactopiranòsid.L'ONPG es pot hidrolitzar en galactosa i o-nitrofenol groc (ONP) per la β-galactosidasa, de manera que l'activitat de la β-galactosidasa es pot detectar pel canvi de color del medi de cultiu.
La lactosa és un sucre que la majoria de microorganismes necessiten detectar.El seu metabolisme requereix dos enzims, un és la permeasa cel·lular, la lactosa entra a les cèl·lules sota l'acció de la permeasa;l'altra és la β-galactosidasa, que hidrolitza la lactosa en galactosa.Lactosa i glucosa.La β-galactosidasa també pot actuar directament sobre l'ONPG per hidrolitzar-lo en galactosa i o-nitrofenol groc (ONP).Es pot fer en 24h, fins i tot amb fermentadors retardats de lactosa.Per tant, explica els resultats de l'observació de recollir el cultiu 1 de la inclinació d'agar i inocular-lo en cercle complet a 36 °C durant 1-3h i 24h.Si es produeix β-galactosidasa, es tornarà groc en 1-3 h, si no hi ha aquest enzim, no canviarà de color en 24 h.
Segons els dos enzims anteriors, els microorganismes es poden dividir en les següents categories:
1 bacteri fermentador de lactosa (18-24 hores) amb permeasa i β-galactosidasa P + G +;
2 Fermentadors de lactosa retardats (que triguen més de 24 hores) sense permeasa però amb galactosidasa: P-G+.
3 Fermentadors sense lactosa sense permeasa i galactosidasa: P-G-.
La prova ONPG es pot utilitzar per distingir els bacteris fermentadors de lactosa (P-G+) dels bacteris de lactosa no fermentants (PG-), com ara:
1 Diferenciar els fermentadors tardans de lactosa (P-G+) dels fermentadors no lactosos (P-G-).
(a) Citrobacter (+) i Salmonella arizonae (+) de Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) de Shigella sonnei (-).
Per què es va realitzar l'assaig ONPG utilitzant un cultiu nocturn sobre trisacàrid fèrric de clorur de sodi al 3% (trisacàrid de ferro)?La nostra empresa ha consultat molta informació, però no hi ha una declaració clara.Només al lloc web de la FDA, hi ha escrit que "Inoculeu els cultius que s'han de provar en inclinacions d'agar de ferro de sucre triple i incubeu durant 18 h a 37 °C (o una altra temperatura adequada, si cal). També es pot utilitzar un % de lactosa".significa: els bacteris de prova es van inocular en el medi de ferro trisacàrid i es van cultivar a 37 ° C durant 18 h.També són acceptables els slants d'agar nutrient (o un altre) medi que contingui 1% de lactosa.Per tant, es dedueix que el medi de ferro trisacàrid conté lactosa.Després del creixement durant la nit, els bacteris han produït una bona β-galactosidasa activa.Utilitzant aquests bacteris, ONPG es pot descompondre per β-galactosidasa més ràpidament.El fenomen experimental és més ràpid i millor manifestat.A més, l'addició gota a gota de toluè i un bany d'aigua durant 5 minuts són tot per alliberar completament la β-galactosidasa.
