Productes

1. Els mètodes d'elaboració de perfils de metabòlits són eines importants per mesurar les agrupacions de metabòlits en sistemes biològics.Tot i que la majoria dels mètodes de perfil de metabòlits informen d'intensitats relatives o depenen d'uns quants estàndards interns que representen tots els metabòlits, l'últim requisit per a una descripció quantitativa del conjunt de metabòlits en cèl·lules i fluids biològics és la determinació de la concentració absoluta.Informem aquí un mètode de perfilació de metabòlits dirigit a cromatografia de gasos/espectrometria de masses en tàndem (GC/MS/MS) d'alt rendiment i sensible que permet la quantificació absoluta de tots els metabòlits detectats.El mètode es basa en la derivatització i quantificació del cloroformiat de metil mitjançant l'addició de mostres amb estàndards de metabòlits derivatitzats per separat amb reactius de derivatització deuterats.La ionització tradicional per impacte d'electrons es substitueix per la ionització química positiva, ja que aquesta última preserva en molt més gran mesura l'ió molecular i altres fragments d'alt pes molecular.Això va fer que fos més fàcil seleccionar transicions MS/MS úniques entre els molts metabòlits coeluents.Actualment, el nou mètode GC/MS/MS inclou 67 metabòlits primaris comuns dels quals la majoria pertanyen als grups d'àcids orgànics amino i no amino.Mostrem l'aplicabilitat del mètode en mostres d'orina i sèrum.El mètode és una millora significativa de la metodologia actual per al perfil quantitatiu de metabòlits GC/MS d'aminoàcids i àcids orgànics no aminoàcids.

El 2.24S-hidroxicolesterol (24OHC) i el 27-hidroxicolesterol (27OHC) són dos oxisterols estructuralment similars de diferents orígens: el primer es va formar gairebé exclusivament al cervell i el segon es va formar en menor mesura al cervell que a la majoria dels altres òrgans.HIPÒTESI A PROVA: El dany neuronal i/o la desmielinització provoquen un augment del flux de 24OHC del cervell al líquid cefaloraquidi (LCR), mentre que un defecte de la barrera hematoencefàlica provoca un augment del flux de 27OHC de la circulació al LCR. Dilució d'isòtops-massa. es va utilitzar l'espectrometria per analitzar els dos oxisterols en LCR i plasma de més de 250 pacients amb diferents malalties neurològiques i geriàtriques. Els nivells de LCR dels dos oxisterols es van veure molt més afectats per les diferents malalties que els nivells plasmàtics.Els pacients amb malalties desmielinizants actives tenien nivells augmentats de 24OHC en LCR amb una relació 24OHC/27OHC relativament alta.Els pacients amb meningitis en general tenien nivells elevats d'ambdós esteroides amb una relació baixa 24OHC/27OHC.Els pacients amb malaltia d'Alzheimer tenien nivells lleugerament augmentats de 24OHC en LCR amb menys augment de 27OHC.Els pacients amb esclerosi múltiple tenien tendència a tenir nivells més alts de 24OHC durant els períodes actius amb una proporció elevada de 24OHC/27OHC. Les mesures dels dos oxisterols en el LCR i el plasma poden augmentar significativament els mètodes bioquímics existents per a l'avaluació de malalties neurològiques.