Productes

Més del 70% dels gliomes de baix grau porten una mutació heterozigota R132H en el gen que codifica la isocitrat deshidrogenasa 1 (IDH1).Això confereix a l'enzim la nova capacitat de convertir l'α-cetoglutarat en 2-hidroxiglutarat, donant lloc finalment a la tumorigènesi.La principal font de producció de 2-hidroxiglutarat és la glutamina, que, en càncer, també és una font d'anaplerosi del cicle de l'àcid tricarboxílic (TCA).Una font alternativa d'anaplerosi és el flux de piruvat a través de la piruvat carboxilasa (PC), que és una via comuna en astròcits normals.L'objectiu d'aquest estudi era determinar si la PC serveix com a font d'anaplerosi de TCA en cèl·lules mutants IDH1 on la glutamina s'utilitza per a la producció de 2-hidroxiglutarat. Es van investigar astròcits humans normals immortalitzats dissenyats per expressar IDH1 mutant heterozigot o IDH1 de tipus salvatge.El flux de piruvat mitjançant PC i mitjançant piruvat deshidrogenasa (PDH) es va determinar mitjançant l'espectroscòpia de ressonància magnètica per sondar l'etiquetatge de glutamat i glutamina derivats de la glucosa [2-¹³C] derivats de la glucosa ¹³C.Es van utilitzar assajos d'activitat, RT-PCR i western blotting per sondar l'expressió i l'activitat dels enzims rellevants.Les dades de l'Atles del genoma del càncer (TCGA) es van analitzar per avaluar l'expressió d'enzims en mostres de glioma humà. En comparació amb les cèl·lules de tipus salvatge, les cèl·lules IDH1 mutants van augmentar significativament el flux fraccionat a través de la PC.Això es va associar amb un augment significatiu de l'activitat i l'expressió de PC.Paral·lelament, l'activitat de la PDH va disminuir significativament, probablement mediada per un augment significatiu de la fosforilació inhibitòria de la PDH per part de la PDH quinasa 3. D'acord amb l'observació a les cèl·lules, l'anàlisi de les dades de TCGA va indicar un augment significatiu de l'expressió de PC en mostres de glioma humà que expressaven IDH mutants en comparació amb les de les cèl·lules salvatges. tipus IDH. Les nostres troballes suggereixen que els canvis en PC i PDH poden ser una part important de l'adaptació cel·lular a la mutació IDH1 i poden servir com a dianes terapèutiques potencials.