Productes

Efectes dels detergents sobre l'activitat de la P-glicoproteïna atpasa: diferències en les pertorbacions de les activitats basals i dependents del verapamil.

La glicoproteïna P (P-gp), una glicoproteïna de la membrana plasmàtica associada amb el fenotip de resistència a múltiples fàrmacs, és responsable de l'eflux depenent de l'ATP de diversos fàrmacs amfifílics.Utilitzant vesícules de membrana preparades a partir de la línia cel·lular resistent a múltiples fàrmacs DC-3F/ADX, vam estudiar la pertorbació de les activitats basals (és a dir, en absència de fàrmac) i dependents del verapamil P-gp ATPasa induïdes per diversos detergents, en no solubilització, així com a concentracions solubilitzants.La solubilització progressiva de la membrana amb l'augment de la concentració de detergent es va controlar mitjançant experiments de dispersió de la llum i centrifugació.Per a les concentracions de detergents no solubilitzants, tots els detergents provats, excepte el DOC, van induir una inhibició parcial de l'activitat ATPasa de P-gp, que no es va correlacionar amb la quantitat dels diversos detergents provats incorporats a les membranes.L'anàlisi de l'activació de P-gp induïda per verapamil revela que l'activitat ATPasa de P-gp està modulada de manera diferent pels diversos detergents a concentracions no solubilitzants.Així, és més probable que es produeixin interaccions específiques entre P-gp i detergents en lloc d'una pertorbació global de la membrana.Després de la solubilització pels diferents detergents provats, l'activitat basal de P-gp ATPasa es va inhibir pràcticament completament, excepte en presència de CHAPS que va poder preservar aquesta activitat a un nivell comparable al mesurat a les membranes natives.Tanmateix, l'activació P-gp ATPasa induïda per verapamil es va perdre durant la solubilització de P-gp per CHAPS, però es va recuperar després de la dilució de CHAPS per sota de la seva concentració micel·lar crítica.Aquestes observacions indiquen interaccions específiques entre les molècules P-gp i CHAPS dins de les micel·les mixtes.En general, les nostres dades que evidencien interaccions específiques P-gp/detergents són coherents amb la ubicació dels llocs de transport de fàrmacs als dominis transmembrana P-gp.